【产品名称】M2299  MB培养基基础

【使用方法】

    在80%N2+20%CO2环境下称取本品17.3g于910ml蒸馏水或去离子水中，煮沸3分钟，连续通入80%N2+20%CO2混合气体直至温度降至25℃；加入碳酸氢钠4g，调节pH至6.8-7.0，分装，121℃灭菌15分钟。每升培养基加入无菌的50ml甲酸钠溶液、10ml硫化钠溶液、10ml半胱氨酸盐酸盐溶液、10ml维生素溶液、10ml微量元素溶液（S2225）和1ml亚硒酸盐-钨酸盐溶液（SD052），混匀，使用NaOH调节使最终pH至7.2。

 【备注】

1、甲酸钠溶液：甲酸钠6.8g于去离子水50ml中，充入100%氮气，过滤除菌。

2、硫化钠溶液：九水硫酸钠0.25g于10ml去离子水中，充入100%氮气，121℃灭菌15分钟。

3、半胱氨酸盐酸盐溶液：L-半胱氨酸盐酸盐一水物0.25g于10ml去离子水中，充入100%氮气，121℃灭菌15分钟。

4、维生素溶液：维生素B6 10mg；维生素B1 5mg；维生素B2 5mg；烟酸5mg；泛酸钙5mg；p-氨基苯甲酸5mg、硫辛酸5mg；生物素2mg；叶酸2mg；维生素B12 0.1mg，去离子水1000ml，充入80%H₂+20%CO₂的混合气体，过滤除菌。(可考虑使用我司的SD014产品)

5、微量元素溶液：7水硫酸镁3g；氮三乙酸1.5g；氯化钠1g；2水硫酸锰0.5g；7水硫酸钴0.18g；7水硫酸锌0.18g；2水氯化钙0.1g；7水硫酸亚铁0.1g；6水氯化镍0.025g；12水硫酸铝钾0.02g；硼酸0.01g；4水钼酸钠0.01g；5水硫酸铜0.01g；5水亚硒酸钠0.3mg；去离子水1000ml，KOH调节pH至6.5,121℃高压灭菌15分钟。

（该微量元素溶液可使用我公司的S2225产品）

6、亚硒酸盐-钨酸盐溶液：氢氧化钠0.5g；2水钨酸钠4mg；5水亚硒酸钠3mg，去离子水1000ml，充入100%氮气，过滤除菌。（该溶液可使用我公司的SD052产品）